Novo produto - Solução IHC rápida e congelada

2023-12-08

Por celnovte

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A Celnovte orgulha-se de apresentar um kit avançado de congelação rápida, que inclui uma formulação melhorada de fixadores e métodos optimizados de fixação de tecidos. Esta inovação assegura a consistência da morfologia dos tecidos congelados com os tecidos incluídos em parafina, preservando a integridade dos tecidos sem comprometer a estrutura. O resultado é uma morfologia de tecido melhorada, levando a uma coloração mais nítida e clara - uma ajuda inestimável para os patologistas na interpretação dos seus resultados.

Secção 1: Preparação de secções de tecido

Preparar amostras de tecido fresco de tamanho adequado e colocar pedaços de tecido num suporte com uma quantidade adequada de meio de incorporação OTC. Após a congelação rápida do tecido num crióstato com temperatura controlada (normalmente entre -21°C e -26°C), cortar os blocos de tecido congelado em fatias finas de aproximadamente 5μm de espessura. Deixar as fatias de tecido ligeiramente no bloco e, em seguida, pressionar suavemente uma lâmina rotulada à temperatura ambiente sobre o tecido, permitindo que o tecido se funda rapidamente na lâmina de vidro.

Nota: Os diferentes tecidos podem ter diferentes temperaturas óptimas de congelação.

Secção 2: Processo de coloração

2.1 Fixação de tecidos de secção congelada

Colocar imediatamente as lâminas de tecido congelado aderentes numa solução de fixação e fixar durante 30 segundos a 1 minuto. Nota: Para obter resultados de coloração óptimos, utilize a solução de fixação fornecida pela Sanotec. Os fixadores de outras marcas devem ser validados por técnicos de patologia quanto à sua eficácia antes de serem utilizados.*

2.2 Enxaguamento pós-fixação

Depois de fixar as lâminas, retirá-las e agitá-las suavemente em água da torneira para remover completamente a solução de fixação e o meio de incorporação OTC das lâminas. Nota: Enxaguar suavemente para evitar o descolamento dos tecidos.

2.3 Bloqueio

Depois de remover a solução de fixação residual e o meio de inclusão, utilizar uma caneta de imunohistoquímica para delinear a área do tecido testado. Adicionar uma quantidade adequada de reagente de bloqueio e incubar durante 20 segundos. Em seguida, lavar as lâminas com solução de lavagem TBS durante 30 segundos.

2.4 Adicionar anticorpo primário*

Remover o excesso de solução de lavagem das lâminas, adicionar uma quantidade adequada de reagente de anticorpo primário específico para imunohistoquímica congelado Sanotec dentro da área delineada e incubar durante 2-4 minutos. Lavar as lâminas com solução de lavagem TBS durante 30 segundos. Nota: Assegurar que o anticorpo está à temperatura ambiente antes de o utilizar. O aumento da temperatura de incubação do anticorpo pode melhorar a coloração.

2.5 Adicionar anticorpo secundário

Remover o excesso de solução de lavagem das lâminas, adicionar uma quantidade adequada de reagente de anticorpo secundário específico para imunohistoquímica congelado Sanotec dentro da área delineada e incubar durante 2-3 minutos. Lavar as lâminas com solução de lavagem TBS durante 30 segundos. Nota: Não reduzir excessivamente o tempo de lavagem para evitar uma coloração de fundo não específica.

2.6 Adicionar DAB

Retirar o excesso de solução de lavagem das lâminas, adicionar uma quantidade adequada de solução cromogénica DAB na área delimitada e incubar durante cerca de 90 segundos. Em seguida, lavar com água pura durante 30 segundos. Nota: Preparar a solução de DAB de fresco antes de a utilizar. A duração efectiva da solução de DAB preparada é de 6 horas à temperatura ambiente (25°C) e de 12 horas a 4°C.

2.7 Contracoloração com hematoxilina

Adicionar uma quantidade adequada de solução de coloração de hematoxilina, incubar durante cerca de 10 segundos e depois enxaguar com água pura durante 30 segundos. Nota: A solução de coloração de contraste deste kit tem uma forte capacidade de coloração. Não prolongar demasiado o tempo de coloração de contraste, especialmente para a coloração nuclear, uma vez que uma coloração de contraste prolongada pode afetar a interpretação dos resultados positivos.