Nouveau produit - Solution IHC à congélation rapide

2023-12-08

Par celnovte

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Celnovte est fier de présenter un kit de congélation rapide avancé, comprenant une formulation améliorée du fixateur et des méthodes optimisées de fixation des tissus. Cette innovation garantit la cohérence de la morphologie des tissus congelés avec les tissus inclus en paraffine, en préservant l'intégrité des tissus sans compromettre la structure. Il en résulte une meilleure morphologie des tissus, qui se traduit par des colorations plus nettes et plus claires - une aide précieuse pour les pathologistes dans l'interprétation de leurs résultats.

Section 1 : Préparation des coupes de tissus

Préparer des échantillons de tissus frais de taille appropriée et placer des morceaux de tissus sur un support avec une quantité adéquate de milieu d'enrobage OTC. Après congélation rapide du tissu dans un cryostat à température contrôlée (communément entre -21°C et -26°C), coupez les blocs de tissu congelés en fines tranches d'environ 5μm d'épaisseur. Laissez les tranches de tissu légèrement sur le bloc, puis appuyez doucement sur une lame étiquetée à température ambiante sur le tissu, ce qui permet au tissu de fondre rapidement sur la lame de verre.

Note: Les températures optimales de congélation peuvent varier d'un tissu à l'autre.

Section 2 : Processus de coloration

2.1 Fixation des coupes de tissus congelés

Placer immédiatement les lames de tissu congelé collées dans une solution de fixation et fixer pendant 30 secondes à 1 minute. Note: Pour des résultats de coloration optimaux, utiliser la solution de fixation fournie par Sanotec. L'efficacité des fixateurs d'autres marques doit être validée par les techniciens en pathologie avant leur utilisation.

2.2 Rinçage post-fixation

Après avoir fixé les lames, retirez-les et secouez-les doucement dans de l'eau du robinet pour éliminer complètement la solution de fixation et le milieu d'enrobage OTC des lames. Note: Rincer doucement pour éviter le détachement des tissus.

2.3 Blocage

Après avoir éliminé la solution de fixation résiduelle et le milieu d'inclusion, utiliser un stylo d'immunohistochimie pour délimiter la zone du tissu testé. Ajouter une quantité appropriée de réactif de blocage et incuber pendant 20 secondes. Laver ensuite les lames avec la solution de lavage TBS pendant 30 secondes.

2.4 Ajouter l'anticorps primaire*

Retirer l'excès de solution de lavage des lames, ajouter une quantité appropriée de réactif d'anticorps primaire spécifique à l'immunohistochimie congelée Sanotec dans la zone délimitée et incuber pendant 2 à 4 minutes. Laver les lames avec la solution de lavage TBS pendant 30 secondes. Note: S'assurer que l'anticorps est à température ambiante avant de l'utiliser. L'augmentation de la température d'incubation de l'anticorps peut améliorer la coloration.

2.5 Ajouter l'anticorps secondaire

Retirer l'excès de solution de lavage des lames, ajouter une quantité appropriée de réactif d'anticorps secondaire spécifique à l'immunohistochimie congelée Sanotec dans la zone délimitée et incuber pendant 2 à 3 minutes. Laver les lames avec la solution de lavage TBS pendant 30 secondes. Note: Ne pas raccourcir excessivement le temps de lavage afin d'éviter une coloration de fond non spécifique.

2.6 Ajouter le DAB

Éliminer l'excès de solution de lavage des lames, ajouter une quantité appropriée de solution chromogène DAB dans la zone délimitée et incuber pendant environ 90 secondes. Rincer ensuite à l'eau pure pendant 30 secondes. Note: Préparer fraîchement la solution DAB avant de l'utiliser. La durée d'efficacité de la solution DAB préparée est de 6 heures à température ambiante (25°C) et de 12 heures à 4°C.

2.7 Contre-coloration à l'hématoxyline

Ajouter une quantité appropriée de solution de contre-coloration à l'hématoxyline, incuber pendant environ 10 secondes, puis rincer à l'eau pure pendant 30 secondes. Note: La solution de contre-coloration contenue dans ce kit a une forte capacité de coloration. Ne pas dépasser le temps de contre-coloration, en particulier pour la coloration nucléaire, car une contre-coloration prolongée peut affecter l'interprétation des résultats positifs.