Das MicroStacker™ Polymer Detection System Universal ist ein biotinfreies, polymeres Meerrettichperoxidase (HRP)-Sekundärantikörper-Konjugatsystem für den Nachweis von Maus- und Kaninchen-Primärantikörpern auf formalinfixiertem, paraffineingebettetem (FFPE) Gewebe in einem immunhistochemischen (IHC) Verfahren. Die innovative MicroStacker™-Technologie ermöglicht eine gut kontrollierte Stapelung von Antikörpern und Peroxidase-Enzymen auf einem Mikro-Polymer-Gerüst. Diese Technik führt zu einer kompakten Polymerstruktur, die leicht in alle zellulären Kompartimente eindringt und im Vergleich zu anderen herkömmlichen HRP-Polymeren mit sperrigen Dextran-Rückgraten eine höhere Empfindlichkeit bietet. Außerdem verwendet das System F(ab')-Fragmente des sekundären IgG-Antikörpers anstelle des gesamten IgG, wodurch der Hintergrund vermieden wird, der durch die unspezifische Bindung des gesamten IgG an die endogenen Fc-Rezeptoren verursacht wird.
Immunhistochemie (formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Gewebe)
Abtrennung: Objektträger in Xylol entparaffinieren. Objektträger in einer Reihe von abgestuften Alkoholen zu Wasser hydratisieren.
Peroxidase-Block: 5 Minuten lang mit Peroxidase-Blockierungsmitteln blockieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Antigenabruf-Protokoll: Das empfohlene Antigenrückgewinnungsprotokoll entnehmen Sie bitte dem Datenblatt des jeweiligen Primärantikörpers.
Primärer Antikörper: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel wie nötig vom gebrauchsfertigen primären Antikörper auf die Probe auftragen. Für 30-60 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Erkennung Polymer: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel Anti-Maus/Kaninchen-HRP-Polymer auftragen, dass die Probe bedeckt ist. Für 30 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
DAB-Chromogen: Bereiten Sie eine gebrauchsfertige DAB-Substratlösung vor. Geben Sie DAB-Chromogen zu DAB-Substratpuffer und mischen Sie die beiden Lösungen im Verhältnis 1:20, wobei sich das Volumen nach der Anzahl der zu färbenden Objektträger richtet. Im Allgemeinen reichen 100 ml der gebrauchsfertigen Substratlösung aus, um einen Objektträger zu bedecken.
5 Minuten lang bei RT mit der gebrauchsfertigen Substratlösung inkubieren. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Gegenstimme: Mit Hämatoxylin gegenfärben. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Anmerkung:
Verwenden Sie TBS-T oder PBS-T als Waschpuffer.
Lagerung:
Bei 2°C bis 8°C lagern, nicht einfrieren.
Datenüberprüfungen: Seite-an-Seite-Vergleich
Manuelles Färbeverfahren:
Inkubation des primären Antikörpers: RT, 60 Minuten
Inkubation der sekundären Antikörper: RT, 30 Minuten
DAB-Inkubation:5min
Detektionspolymere im Vergleich:
MicroStackerTM Polymer-Detektionskit, Universal
DAKO REAL EnVision Detektionssystem
Experimentelle Ergebnisse:
Brust (Her-2 / monoklonaler Kaninchen-Antikörper)
REAL EnVision Detektionssystem
MicroStackerTM Polymer-Detektion, Universal
Eierstock (CK5 / monoklonaler Kaninchen-Antikörper)
REAL EnVision Detektionssystem
MicroStackerTM Polymer-Detektion, Universal
Code |
Produktname |
Komponenten |
Spezifikation |
SD3100 |
MicroStackerTM Polymer-Detektionskit, Universal (3 Komponenten) |
MicroStackerTM Anti-Maus/Kaninchen HRP-Polymer |
100ml(1000T) |
20*DAB Chromogen |
5ml |
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DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
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MicroStackerTM Anti-Maus/Kaninchen HRP-Polymer |
30ml (300T) |
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20*DAB Chromogen |
1,5ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
30ml |
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MicroStackerTM Anti-Maus/Kaninchen HRP-Polymer |
10ml (100T) |
||
20*DAB Chromogen |
1ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
10ml |