O Sistema de Deteção de Polímeros MicroStacker™ é um sistema conjugado de anticorpos secundários com peroxidase de rábano polimérica (HRP), isento de biotina, para a deteção de anticorpos primários de rato e coelho em tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina (FFPE) num procedimento de imunohistoquímica (IHC). A inovadora tecnologia MicroStacker™ permite o empilhamento em camadas bem controlado de anticorpos e enzimas peroxidase numa estrutura de micro-polímero. Esta técnica resulta numa estrutura polimérica compacta que penetra facilmente em todos os compartimentos celulares. Além disso, o sistema utiliza fragmentos F(ab') do anticorpo secundário IgG em vez da IgG inteira, o que evita o fundo causado pela ligação não específica da IgG inteira aos receptores Fc endógenos. O kit de deteção MicroStacker™ goat anti-rabbit HRP-polymer é utilizado principalmente para a coloração de anticorpos monoclonais de coelho/anticorpos policlonais de coelho em tecidos de rato/rato e para a deteção de anticorpos de coelho.
Destino: Desparafinação de lâminas em xileno. Hidratar as lâminas numa série de álcoois graduados em água.
Bloqueio da peroxidase: Bloquear durante 5 minutos com reagentes de bloqueio da peroxidase. Enxaguar 2 vezes com tampão de lavagem durante 5 minutos cada.
Protocolo de recuperação de antigénios: Consultar a folha de dados do respetivo anticorpo primário para obter o protocolo de recuperação de antigénio recomendado.
Anticorpo primário: Aplicar 2 gotas (100ul) ou a quantidade necessária de anticorpo primário pronto a usar para cobrir a amostra. Incubar durante 30-60 minutos à temperatura ambiente. Enxaguar 2 vezes com tampão de lavagem durante 5 minutos cada.
Polímero de deteção: Aplicar 2 gotas (100ul) ou a quantidade necessária de polímero HRP anti-rato/coelho para cobrir a amostra. Incubar durante 30 minutos à temperatura ambiente. Enxaguar 2 vezes com tampão de lavagem durante 5 minutos cada.
Cromogénio DAB: Preparar uma solução de substrato DAB pronta a utilizar. Adicionar o cromogénio DAB ao tampão de substrato DAB e misturar as duas soluções numa proporção de 1:20, sendo o volume determinado pelo número de lâminas a corar. Em geral, 100ul de solução de substrato pronta a usar são suficientes para cobrir uma lâmina de tecido.
Incubar durante 5 minutos à temperatura ambiente com a solução de substrato pronta a utilizar. Lavar as lâminas com água desionizada.
Contraindicação: Corar com hematoxilina. Lavar as lâminas com água desionizada.
Incubação do anticorpo primário: RT, 60min
Incubação de anticorpos secundários: RT, 30min
Incubação com DAB: 5min
Análises de dados: comparação lado a lado
Comparação dos polímeros de deteção:
MicroStackerTM Kit de deteção de polímero HRP anti-coelho de cabra
Polímero HRP de coelho sobre Rodent (American Research Market)
Resultados experimentais:
Rim de ratinho (EGFR)
Coelho-em-Rodent
CNT
Código |
|
Nome do produto |
Componentes |
Especificação |
RS1000 |
Kit de deteção de polímeros MicroStacker™ Goat Anti-Rabbit/Mouse
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3 Componentes |
Polímero HRP anti-coelho/rato |
100ml (1000T) |
20*DAB Cromogénio |
5ml |
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Tampão de substrato DAB |
100ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
30ml (300T) |
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20*DAB Cromogénio |
1,5 ml |
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Tampão de substrato DAB |
30ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
20ml (200T) |
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20*DAB Cromogénio |
1ml |
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Tampão de substrato DAB |
20ml |
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RS1001 |
4 Componentes |
Reagentes de bloqueio da peroxidase |
100ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
100ml |
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20*DAB Cromogénio |
5ml |
|||
Tampão de substrato DAB |
100ml |
|||
Reagentes de bloqueio da peroxidase |
20ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
20ml |
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20*DAB Cromogénio |
1ml |
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Tampão de substrato DAB |
20ml |
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RS1002 |
5 Componentes |
Reagentes de bloqueio da peroxidase |
100ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
100ml (1000T) |
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20*DAB Cromogénio |
5ml |
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Tampão de substrato DAB |
100ml |
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Hematoxilina |
100ml |
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Reagentes de bloqueio da peroxidase |
20ml |
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Polímero HRP anti-coelho/rato |
20ml (200T) |
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20*DAB Cromogénio |
1ml |
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Tampão de substrato DAB |
20ml |
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Hematoxilina |
20ml |