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O kit de coloração High Iron Diamine-Alcian Blue (HID-AB) é utilizado para distinguir entre mucinas ácidas sulfatadas e mucinas ácidas salivares.
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Cloridrato de N,N-dimetil-fenilenodiamina e N,N-dimetil-p-fenilenodiamina
são ambos sais de amónio que têm uma carga positiva quando dissociados. O
o sal de diamónio combina-se com as mucinas ácidas sulfatadas para formar um complexo, que pode ser observado
através de uma mudança de cor. A reação é lenta e o cloreto férrico é utilizado como catalisador para acelerar a reação
coloração. Por um lado, a oxidação dos dois sais de amónio forma uma substância catiónica castanho-escura
cromogénio, o que acelera a coloração. Por outro lado, o pH da solução de coloração diminui para
1.4. A este valor de pH, apenas o grupo sulfato reage com o sal de diamónio para formar um complexo de
castanho-púrpura a castanho-escuro, uma vez que o grupo carboxilo da secção não se pode combinar com o
sal de diamónio. Posteriormente, o azul de Alicina (pH 2,5) cora o muco de ácido siálico carboxilado como
azul, permitindo que o muco ácido dos dois grupos principais seja mostrado separadamente.
a) Elevada especificidade
b) Simples de operar
c) Fácil de identificar
Reagente |
Componente principal |
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Solução HID |
Cloridrato de N,N-dimetil-fenilenodiamina, cloridrato de N, N-dimetil-p-fenilenodiamina |
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Solução de cloreto férrico |
Cloreto férrico |
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Solução de azul de Alcian |
Solução de azul de Alcian |
Nota: Cada componente deste produto não pode ser utilizado separadamente, e os componentes de diferentes
os números de lote não podem ser utilizados indistintamente.
Interpretação dos resultados
Após a coloração, a apresentação cromática das mucinas ácidas sulfatadas varia entre o castanho arroxeado e o castanho-preto. As mucinas ácidas carboxiladas aparecem a azul. O núcleo da célula não é corado.
20X
10X