MicroStacker™ Polymer Detection System is a biotin-free, polymeric horseradish peroxidase (HRP)- secondary antibody conjugate system for the detection of mouse and rabbit primary antibody on formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues in an immunohistochemistry (IHC) procedure. The innovative MicroStacker™ technology allows well-controlled layered stacking of antibodies and peroxidase enzymes on a micro-polymer scaffold. This technique results in a compact polymeric structure that easily penetrates to all cellular compartments. Plus, the system utilizes F(ab’) fragments of IgG secondary antibody instead of the whole IgG, which avoids the background caused by non-specific binding of whole IgG to endogenous Fc receptors. MicroStacker™ goat anti-rabbit HRP-polymer detection kit is mainly used for staining rabbit monoclonal antibody/rabbit polyclonal antibody on mouse/rat tissues and detection of rabbit antibodies.
デパラフィネーション スライドをキシレンで脱パラフィンする。段階的なアルコールから水にスライドを移す。
ペルオキシダーゼ・ブロック ペルオキシダーゼブロック試薬で5分間ブロックする。洗浄バッファーで5分間ずつ2回洗浄する。
抗原回収プロトコル: 推奨される抗原回収プロトコールについては、それぞれの一次抗体のデータシートをご参照ください。
一次抗体: すぐに使用できる一次抗体を2滴(100ul)または必要量、検体を覆うように塗布する。RT で 30~60 分インキュベートする。洗浄バッファーで5分間ずつ2回洗浄する。
検出ポリマー: 検体を覆うように抗マウス/ウサギ HRP ポリマーを 2 滴(100ul)または必要なだけ滴下する。RTで30分間インキュベートする。洗浄バッファーで5分間ずつ2回洗浄する。
DAB発色剤: すぐに使えるDAB基質溶液を準備する。DAB 基質バッファーに DAB 発色剤を加え、2 つの溶液を 1:20 の割合で混合します。一般的には、100ulの既製基質溶液でスライド1枚分の染色が可能です。
すぐに使える基質溶液で5分間インキュベートする。脱イオン水でスライドをすすぐ。
反対票: ヘマトキシリンでカウンターステインする。脱イオン水でスライドをすすぐ。
一次抗体のインキュベーションRT、60分
二次抗体インキュベーション:RT、30分
DAB incubation: 5min
データレビュー:並べて比較
検出ポリマーの比較:
マイクロスタッカーTM Goat Anti-Rabbit HRP-Polymer Detection Kit
ラビットオンロデントHRPポリマー(アメリカンリサーチマーケット)
実験結果:
Mouse kidney (EGFR)
Rabbit-on-Rodent
CNT
コード |
|
製品名 |
コンポーネント |
仕様 |
RS1000 |
MicroStacker™ ヤギ抗ウサギ/マウスポリマー検出キット
|
3 Components |
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
20*DABクロモゲン |
5ミリリットル |
|||
DAB基質バッファー |
100ミリリットル |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
30ml (300T) |
|||
20*DABクロモゲン |
1.5ml |
|||
DAB基質バッファー |
30ミリリットル |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ml (200T) |
|||
20*DABクロモゲン |
1ml |
|||
DAB基質バッファー |
20ミリリットル |
|||
RS1001 |
4 Components |
ペルオキシダーゼ阻害試薬 |
100ミリリットル |
|
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ミリリットル |
|||
20*DABクロモゲン |
5ミリリットル |
|||
DAB基質バッファー |
100ミリリットル |
|||
ペルオキシダーゼ阻害試薬 |
20ミリリットル |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ミリリットル |
|||
20*DABクロモゲン |
1ml |
|||
DAB基質バッファー |
20ミリリットル |
|||
RS1002 |
5 Components |
ペルオキシダーゼ阻害試薬 |
100ミリリットル |
|
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
|||
20*DABクロモゲン |
5ミリリットル |
|||
DAB基質バッファー |
100ミリリットル |
|||
ヘマトキシリン |
100ミリリットル |
|||
ペルオキシダーゼ阻害試薬 |
20ミリリットル |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ml (200T) |
|||
20*DABクロモゲン |
1ml |
|||
DAB基質バッファー |
20ミリリットル |
|||
ヘマトキシリン |
20ミリリットル |