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MicroStacker™ Polymer Detection System Universal is a biotin-free, polymeric horseradish peroxidase (HRP)- secondary antibody conjugate system for the detection of mouse and rabbit primary antibody on formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues in an immunohistochemistry (IHC) procedure. The innovative MicroStacker™ technology allows well-controlled layered stacking of antibodies and peroxidase enzymes on a micro-polymer scaffold. This technique results in a compact polymeric structure that easily penetrates to all cellular compartments, which provides superior sensitivity compared to other conventional HRP polymers with bulky dextran backbones. Plus, the system utilizes F(ab’) fragments of IgG secondary antibody instead of the whole IgG, which avoids the background caused by non-specific binding of whole IgG to endogenous Fc receptors. After mouse/rat serum cross-adsorption, MicroStacker™ Rabbit-on-Rodent HRP-polymer detection kit can significantly reduce non-specific staining caused by endogenous immunoglobulin. The kit is mainly used for rabbit monoclonal antibody/rabbit polyclonal antibody on mouse/rat tissues staining.
Deparaffination: Desparafinar los portaobjetos en xileno. Hidratar los portaobjetos en una serie de alcoholes graduados a agua.
Bloqueo de peroxidasa: Bloquear durante 5 minutos con reactivos bloqueantes de peroxidasas. Aclarar 2 veces con tampón de lavado durante 5 minutos cada una.
Protocolo de recuperación de antígenos: Consulte la ficha técnica del anticuerpo primario correspondiente para conocer el protocolo de recuperación de antígenos recomendado.
Anticuerpo primario: Aplicar 2 gotas (100ul) o la cantidad necesaria de anticuerpo primario listo para usar para cubrir la muestra. Incubar durante 30-60 minutos a temperatura ambiente. Aclarar 2 veces con tampón de lavado durante 5 minutos cada vez.
Polímero de detección: Aplicar 2 gotas (100ul) o la cantidad necesaria de anti-Mouse/Rabbit HRP-Polymer para cubrir la muestra. Incubar durante 30 minutos a temperatura ambiente. Aclarar 2 veces con tampón de lavado durante 5 minutos cada vez.
Cromógeno DAB: Prepare una solución de sustrato DAB lista para usar. Añada el cromógeno DAB al tampón de sustrato DAB y mezcle las dos soluciones en una proporción de 1:20 con el volumen determinado por el número de portaobjetos a teñir. En general, 100ul de solución de sustrato lista para usar es suficiente para cubrir un portaobjetos de tejido.
Incubar durante 5 minutos a temperatura ambiente con la solución de sustrato lista para usar. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada.
Contrarrestar: Tinción con hematoxilina. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada.
Revisiones de datos: comparación por pares
Procedimiento de tinción:
Incubación del anticuerpo primario: RT, 60min
Incubación de anticuerpos secundarios: RT, 30min
Incubación DAB:5min
Polímeros de detección en comparación:
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit
Rabbit-on-Rodent HRP-polymer (American Research Market)
Resultados experimentales:
Mouse liver (FAH rabbit monoclonal antibody)
Rabbit-on-Rodent HRP-polymer
MicroStackerTM Rabbit-on-Mouse
Código |
Nombre del producto |
Componentes |
Especificación |
RS3000 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (3 Components) |
MicroStackerTM Anti-Conejo HRP-Polímero |
100 ml (1000T) |
20*DAB Cromógeno |
5 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
100 ml |
||
MicroStackerTM Anti-Conejo HRP-Polímero |
30 ml (300T) |
||
20*DAB Cromógeno |
1,5 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
30 ml |
||
MicroStackerTM Anti-Conejo HRP-Polímero |
20ml (200T) |
||
20*DAB Cromógeno |
1 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
20 ml |
||
RS3001 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (4 Components) |
Reactivos bloqueadores de peroxidasas |
100 ml |
MicroStackerTM Anti-Conejo HRP-Polímero |
100 ml (1000T) |
||
20*DAB Cromógeno |
5 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
100 ml |
||
Reactivos bloqueadores de peroxidasas |
20 ml |
||
MicroStackerTM Anti-Conejo HRP-Polímero |
20ml (200T) |
||
20*DAB Cromógeno |
1 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
20 ml |
||
RS3002 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (5 Components) |
Reactivos bloqueadores de peroxidasas |
100 ml |
MicroStackerTM Anti-Ratón/Conejo HRP-Polímero |
100 ml (1000T) |
||
20*DAB Cromógeno |
5 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
100 ml |
||
Hematoxilina |
100 ml |
||
Reactivos bloqueadores de peroxidasas |
20 ml |
||
MicroStackerTM Anti-Ratón/Conejo HRP-Polímero |
20ml (200T) |
||
20*DAB Cromógeno |
1 ml |
||
Tampón de sustrato DAB |
20 ml |
||
Hematoxilina |
20 ml |