MicroStacker™ Polymer Detection System Universal is a biotin-free, polymeric horseradish peroxidase (HRP)- secondary antibody conjugate system for the detection of mouse and rabbit primary antibody on formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues in an immunohistochemistry (IHC) procedure. The innovative MicroStacker™ technology allows well-controlled layered stacking of antibodies and peroxidase enzymes on a micro-polymer scaffold. This technique results in a compact polymeric structure that easily penetrates to all cellular compartments, which provides superior sensitivity compared to other conventional HRP polymers with bulky dextran backbones. Plus, the system utilizes F(ab’) fragments of IgG secondary antibody instead of the whole IgG, which avoids the background caused by non-specific binding of whole IgG to endogenous Fc receptors. After mouse/rat serum cross-adsorption, MicroStacker™ Rabbit-on-Rodent HRP-polymer detection kit can significantly reduce non-specific staining caused by endogenous immunoglobulin. The kit is mainly used for rabbit monoclonal antibody/rabbit polyclonal antibody on mouse/rat tissues staining.
Abtrennung: Objektträger in Xylol entparaffinieren. Objektträger in einer Reihe von abgestuften Alkoholen zu Wasser hydratisieren.
Peroxidase-Block: 5 Minuten lang mit Peroxidase-Blockierungsmitteln blockieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Antigenabruf-Protokoll: Das empfohlene Antigenrückgewinnungsprotokoll entnehmen Sie bitte dem Datenblatt des jeweiligen Primärantikörpers.
Primärer Antikörper: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel wie nötig vom gebrauchsfertigen primären Antikörper auf die Probe auftragen. Für 30-60 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Erkennung Polymer: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel Anti-Maus/Kaninchen-HRP-Polymer auftragen, dass die Probe bedeckt ist. Für 30 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
DAB-Chromogen: Bereiten Sie eine gebrauchsfertige DAB-Substratlösung vor. Geben Sie DAB-Chromogen zu DAB-Substratpuffer und mischen Sie die beiden Lösungen im Verhältnis 1:20, wobei sich das Volumen nach der Anzahl der zu färbenden Objektträger richtet. Im Allgemeinen reichen 100 ml der gebrauchsfertigen Substratlösung aus, um einen Objektträger zu bedecken.
5 Minuten lang bei RT mit der gebrauchsfertigen Substratlösung inkubieren. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Gegenstimme: Mit Hämatoxylin gegenfärben. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Datenüberprüfungen: Seite-an-Seite-Vergleich
Färbeverfahren:
Inkubation des primären Antikörpers: RT, 60 Minuten
Inkubation der sekundären Antikörper: RT, 30 Minuten
DAB-Inkubation:5min
Detektionspolymere im Vergleich:
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit
Rabbit-on-Rodent HRP-polymer (American Research Market)
Experimentelle Ergebnisse:
Mouse liver (FAH rabbit monoclonal antibody)
Rabbit-on-Rodent HRP-polymer
MicroStackerTM Rabbit-on-Mouse
Code |
Produktname |
Komponenten |
Spezifikation |
RS3000 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (3 Components) |
MicroStackerTM Anti-Kaninchen HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
20*DAB Chromogen |
5ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
||
MicroStackerTM Anti-Kaninchen HRP-Polymer |
30ml (300T) |
||
20*DAB Chromogen |
1,5ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
30ml |
||
MicroStackerTM Anti-Kaninchen HRP-Polymer |
20ml (200T) |
||
20*DAB Chromogen |
1ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
||
RS3001 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (4 Components) |
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
100ml |
MicroStackerTM Anti-Kaninchen HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
||
20*DAB Chromogen |
5ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
||
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
20ml |
||
MicroStackerTM Anti-Kaninchen HRP-Polymer |
20ml (200T) |
||
20*DAB Chromogen |
1ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
||
RS3002 |
MicroStackerTM Rabbit-on-Rodent HRP-Polymer Detection Kit (5 Components) |
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
100ml |
MicroStackerTM Anti-Maus/Kaninchen HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
||
20*DAB Chromogen |
5ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
||
Hämatoxylin |
100ml |
||
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
20ml |
||
MicroStackerTM Anti-Maus/Kaninchen HRP-Polymer |
20ml (200T) |
||
20*DAB Chromogen |
1ml |
||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
||
Hämatoxylin |
20ml |