MicroStacker™ Polymer Detection System is a biotin-free, polymeric horseradish peroxidase (HRP)- secondary antibody conjugate system for the detection of mouse and rabbit primary antibody on formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues in an immunohistochemistry (IHC) procedure. The innovative MicroStacker™ technology allows well-controlled layered stacking of antibodies and peroxidase enzymes on a micro-polymer scaffold. This technique results in a compact polymeric structure that easily penetrates to all cellular compartments. Plus, the system utilizes F(ab’) fragments of IgG secondary antibody instead of the whole IgG, which avoids the background caused by non-specific binding of whole IgG to endogenous Fc receptors. MicroStacker™ goat anti-rabbit HRP-polymer detection kit is mainly used for staining rabbit monoclonal antibody/rabbit polyclonal antibody on mouse/rat tissues and detection of rabbit antibodies.
Abtrennung: Objektträger in Xylol entparaffinieren. Objektträger in einer Reihe von abgestuften Alkoholen zu Wasser hydratisieren.
Peroxidase-Block: 5 Minuten lang mit Peroxidase-Blockierungsmitteln blockieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Antigenabruf-Protokoll: Das empfohlene Antigenrückgewinnungsprotokoll entnehmen Sie bitte dem Datenblatt des jeweiligen Primärantikörpers.
Primärer Antikörper: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel wie nötig vom gebrauchsfertigen primären Antikörper auf die Probe auftragen. Für 30-60 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
Erkennung Polymer: 2 Tropfen (100 ml) oder so viel Anti-Maus/Kaninchen-HRP-Polymer auftragen, dass die Probe bedeckt ist. Für 30 Minuten bei RT inkubieren. 2 Mal mit Waschpuffer für jeweils 5 Minuten spülen.
DAB-Chromogen: Bereiten Sie eine gebrauchsfertige DAB-Substratlösung vor. Geben Sie DAB-Chromogen zu DAB-Substratpuffer und mischen Sie die beiden Lösungen im Verhältnis 1:20, wobei sich das Volumen nach der Anzahl der zu färbenden Objektträger richtet. Im Allgemeinen reichen 100 ml der gebrauchsfertigen Substratlösung aus, um einen Objektträger zu bedecken.
5 Minuten lang bei RT mit der gebrauchsfertigen Substratlösung inkubieren. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Gegenstimme: Mit Hämatoxylin gegenfärben. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.
Inkubation des primären Antikörpers: RT, 60 Minuten
Inkubation der sekundären Antikörper: RT, 30 Minuten
DAB-Inkubation: 5min
Datenüberprüfungen: Seite-an-Seite-Vergleich
Detektionspolymere im Vergleich:
MicroStackerTM Goat Anti-Rabbit HRP-Polymer Detection Kit
Rabbit-on-Rodent HRP-polymer (American Research Market)
Experimentelle Ergebnisse:
Mouse kidney (EGFR)
Rabbit-on-Rodent
CNT
Code |
|
Produktname |
Komponenten |
Spezifikation |
RS1000 |
MicroStacker™ Goat Anti-Rabbit/Mouse Polymer Detection Kit
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3 Components |
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
20*DAB Chromogen |
5ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
30ml (300T) |
|||
20*DAB Chromogen |
1,5ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
30ml |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ml (200T) |
|||
20*DAB Chromogen |
1ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
|||
RS1001 |
4 Components |
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
100ml |
|
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ml |
|||
20*DAB Chromogen |
5ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
|||
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
20ml |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ml |
|||
20*DAB Chromogen |
1ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
|||
RS1002 |
5 Components |
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
100ml |
|
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
100ml (1000T) |
|||
20*DAB Chromogen |
5ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
100ml |
|||
Hämatoxylin |
100ml |
|||
Peroxidase-Blockierungsreagenzien |
20ml |
|||
Anti-Rabbit/Mouse HRP-Polymer |
20ml (200T) |
|||
20*DAB Chromogen |
1ml |
|||
DAB-Substrat-Puffer |
20ml |
|||
Hämatoxylin |
20ml |